作为肿瘤免疫微环境的重要塑造者，巨噬细胞通过吞噬肿瘤细胞对免疫监视做出了巨大贡献。巨噬细胞响应促吞噬信号和抗吞噬信号平衡吞噬作用，而肿瘤细胞依赖于对抗吞噬信号分子的表达与继承以逃避免疫监视。目前，通过识别和靶向肿瘤中的吞噬免疫检查点来动员巨噬细胞介导的吞噬作用，已经成为开发肿瘤免疫疗法的新策略。新近临床试验已证明联合靶向CD47/SIRPα 吞噬检查点可以激活巨噬细胞的吞噬功效从而提高肿瘤治疗收益。肿瘤细胞表面高表达的配体CD47识别并结合髓系抑制性受体SIRPα，通过阻断巨噬细胞伪足形成从而解构吞噬突触。因此探究CD47/SIRPα下游调控细胞骨架重排的机制有助于更好地开发肿瘤靶向疗法。

2023年1月10日，浙江大学基础医学院/医学院附属邵逸夫医院柯越海课题组在《The Journal of Clinical Investigation》杂志上在线发表研究论文“SHP2 deneddylation mediates tumor immunosuppression in colon cancer via the CD47/SIRPα axis”。该研究揭示了一种由蛋白质翻译后修饰拟素化介导的结肠癌免疫逃逸机制，即拟素化通过影响磷酸酶SHP2的活性从而在肿瘤浸润巨噬细胞中激活CD47/SIRPα axis促进肿瘤免疫逃逸，机制上证明了蛋白质去磷酸化及其与其它修饰的互作在免疫逃逸中的重要调控作用，同时基于现有免疫疗法联合靶向抑制SHP2重塑肿瘤微环境实现了对免疫治疗耐受的结肠癌的治疗。

本研究通过临床数据的分析发现，受CD47/SIRPα信号轴调控肿瘤浸润巨噬细胞的是MSS（微卫星稳定）型结直肠癌维持免疫抑制微环境的重要因素。生信分析层面，单细胞RNA测序数据显示：相对其它类型癌症而言，结直肠癌存在特异的SIRPαhi肿瘤浸润髓系细胞，并且这些细胞具有更高的拟素化分子转录水平。质谱流式数据显示阻断CD47/SIRPα信号轴后，结直肠癌浸润巨噬细胞群中底物拟素化修饰谱的变化依赖于去拟素化酶SENP8。MSS型结直肠癌患者的肿瘤浸润巨噬细胞显示出SENP8和免疫抑制的高相关性。

图1 Neddylation修饰和结直肠癌巨噬细胞免疫逃逸存在显著相关性

质谱数据进一步表明，酪氨酸磷酸酶 SHP2可以发生拟素化修饰，并且SHP2的拟素化在CD47结合并识别巨噬细胞SIRPα后显著减弱。作为一种非受体型酪氨酸磷酸酶，SHP2依赖其自身构象变化行使酶活。分子对接和动力学模拟结合生化实验证明，SHP2在K358和K364位点发生拟素化来维持其构象变化的稳态。活化的SHP2扰乱巨噬细胞吞噬杯处粘着斑相关蛋白的磷酸化稳态，并导致β2整合素失活，细胞骨架重塑，从而抑制巨噬细胞吞噬作用。通过富集拟素化失活SHP2可以增加体内和体外巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬，SHP2抑制剂也增敏了免疫治疗对皮下移植瘤和肿瘤转移的疗效。

图2 磷酸酶SHP2 拟素化调控结直肠癌巨噬细胞免疫逃逸“Don’t eat me” 的作用机制

目前CodeBreaK 100/101 试验 (NCT04185883) 正在评估KRAS G12C 突变抑制剂和联合SHP2抑制剂在局部晚期或转移性结直肠癌患者的效用。此研究提供了有关结直肠癌治疗耐药性的详细信息以及潜在的解决方案。

浙江大学基础医学院博士李仪青和博士生周慧为论文的共同第一作者，浙江大学基础医学院柯越海教授、张雪副教授为共同通讯作者。特别感谢浙江大学转化医学研究院孙毅教授、赵永超教授对本研究的支持和帮助，本研究获得了科技部重点研发计划和国家自然科学基金等资助。